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タイトル: 組換えプロテアーゼの製造方法
著者: 根本, 孝幸 / 根本, 優子
著者(別表記) : Nemoto, Takayuki K. / Ohara-Nemoto, Yuko
発行日: 2008年11月 6日
抄録: 【課題】黄色ブドウ球菌V8プロテアーゼの安価で大量な供給手段の提供。 【解決手段】大腸菌で作動可能なプロモーター、および表皮ブドウ球菌由来グルタミン酸特異的プロテアーゼのプレプロ配列または黄色ブドウ球菌V8プロテアーゼのプレプロ配列を5アミノ酸置換した変異プレプロ配列をコードするヌクレオチドと成熟型プロテアーゼをコードするヌクレオチドとがインフレームで連結されたヌクレオチドを含む発現カセットを含有する、大腸菌で不活性型可溶性プロテアーゼを発現するベクター、前記発現ベクターを含む形質転換体、ならびに、前記形質転換体を培養し、培養上清を回収し、回収した培養上清からプロテアーゼを精製する工程を含む不活性型プロテアーゼの製造方法。 / PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a means for supplying a large quantity of Staphylococcus aureus V8 protease at a low cost. SOLUTION: The invention provides a vector containing an expression cassette containing a promoter acting in E.coli and a nucleotide obtained by the in-frame linking of a nucleotide encoding a prepro sequence of a glutamic acid-specific protease derived from Staphylococcus epidermis or a variant prepro sequence obtained by 5-amino acid substitution of a prepro sequence of Staphylococcus aureus V8 protease with a nucleotide encoding mature protease, and expressing an inactivating soluble protease in E.coli, a transformant containing the expression vector, and a method for the production of an inactivating protease containing a step to culture the transformant, recover the supernatant of the cultured product and the purifying the protease from the recovered supernatant of the cultured product.
記述: 公開番号: 特開2008-263960(P2008-263960A) 公開日:2008-11-06 / 公開特許公報の出典: 特許電子図書館
キーワード: グルタミン酸特異的プロテアーゼ / V8プロテアーゼ / リコンビナントタンパク質 / プロ配列 / 自己消化
URI: http://hdl.handle.net/10069/20952
関連リンク : http://www.ipdl.inpit.go.jp/
資料タイプ: Others
出現コレクション:040 特許情報

引用URI : http://hdl.handle.net/10069/20952



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